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博客文章分类: 化工 化工设备仪器 | 济南福的机械有限公司 发表于 2016年10月11日 |
高效毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以电渗流为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离。CE基本概念包括电泳现象和电渗现象等。 一、电泳现象: 1、电泳: 电泳是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。2、电泳技术:电泳技术是指利用电泳现象对混合物进行分离分析的技术。3、电泳速度:电泳速度是指带电粒子在单位电场强度下泳动的速度。4、电泳淌度:带电粒子在电场中移动的快慢用电泳淌度来表示,一般不用电泳速度表示。电泳淌度是指带电粒子在给定的溶液中,在单位电场强度下的电泳速度,又称电泳迁移率或泳动度。电泳淌度有绝对电泳淌度、有效电泳淌度和表观电泳淌度。(1)绝对电泳淌度:绝对电泳淌度是指在溶液无限稀释时,带电粒子在单位电场强度下的平均电泳速度。它是该带电粒子在一定溶液中的一个特征物理常数。(2)有效电泳淌度:CE不可能在无限稀释而又没有其它带电粒子和酸度等条件下进行电泳,有效电泳淌度是带电粒子的实际电泳淌度。(3)表观电泳淌度:在有电渗存在下,带电粒子的实际电泳淌度称为表观电泳淌度或净淌度,是有效电泳淌度和电渗淌度的矢量和。二、电渗现象:1、电渗:电渗是指在电场作用下,毛细管中液体沿毛细管内表面或或固相多孔物质内液体沿固体表面移动的现象。2、电渗流:电渗现象中整体移动着的液体称为电渗流。电渗流来源于外电场对毛细管内表面和溶液之间双电层的作用。扩散层中的阳离子相对于毛细管内表面的负电荷形成一个圆筒形的阳离子鞘,在外电场作用下,溶液中溶剂化了的阳离子沿滑动面作相对运动,携带着溶剂一起向负极移动,而形成电渗流。电渗流在CE中起着极其重要的作用:(1)电渗流具有象HPLC中泵一样的作用,驱动粒子前进,加上不同粒子电泳速度和方向的差异,完成阳离子、阴离子和中性粒子的分离。(2)改变电渗流的大小和方向,可改变分离效率和选择性。这是CE优化分离的重要因素。(3)电渗流的微小变化影响分离结果的重现性。3、电渗流速度veo:(1)电渗流大小:电渗流大小用电渗流速度veo表示,其大小决定于电渗淌度μeo和电场强度E。即:veo =μeoE =(εζ/η)Eveo可通过实验测定:veo = Lef/teo式中:Lef为毛细管有效长度,teo为电渗标记物(中性物质)的迁移时间。(2)电渗流方向:电渗流方向取决于毛细管内表面的电荷性质。石英毛细管内表面带负电荷,溶液表面带正电荷,电渗流流向负极。但如果将毛细管内表面改性和加电渗流反向剂,使管内表面带正电荷,则溶液表面带负电荷,电渗流流向正极。1)毛细管内表面改性:在毛细管内表面键合或涂渍一层阳离子表面活性剂。2)加电渗流反向剂:在运行缓冲液中加入大量阳离子表面活性剂,使毛细管内表面带正电荷,溶液表面带负电荷,电渗流流向正极。4、电渗淌度μeo:μeo =εζ/η电渗淌度又称电渗迁移率,取决于毛细管内表面的Zeta电位、电泳介质的介电常数和电泳介质粘度,与E无关。 来源:http://www.fudizao.com |
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