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高效毛细管电泳色谱仪（CE）紫外检测器是基于物质对紫外吸收进行检测，是最成熟的检测器，在CE中应用最广。一、工作原理：入射紫外光通过样品时，被吸收的多少符合朗伯－比耳定律。检测点在毛细管的末端，检测点的毛细管的外涂层要烧掉。二、检测方法：1、固定波长：光源为低紫外氘灯，用滤光片获得固定波长的光。2、可变波长：光源为氘灯或钨灯，用单色器（棱镜或光栅）获得连续可调波长的光。3、快速扫描：（1）利用线性二极管阵列快速捕获紫外光。（2）利用硅光电倍增管作快速扫描。4、间接测定：紫外间接测定是在缓冲液中加入有紫外吸收的添加剂，溶质因无紫外吸收而产生倒峰。可解决许多直接检测所不能解决的问题，主要用于离子分析。三、特点：1、通用性好，特别是对蛋白质的适用性很强。2、灵敏度不足。四、提高灵敏度的方法：由于CE检测池的光路长度为毛细管内径，一般不超过100μm，小内径的毛细管限制了紫外检测器的灵敏度，可采用以下几种方法来提高灵敏度。1、优化测定波长：通过测定不同波长下的信噪比来选择最优测定波长，以提高灵敏度。2、减少检测噪音：（1）提高光源强度。（2）采用聚焦和狭缝等减少背景光的影响。（3）采用良好的信号放大系统。3、扩展吸光光路长度：（1）为了克服圆柱形毛细管表面引起的散射、失真等不利的光学特性和增加光路长度，可采用矩形、扁形、Z形和泡型等特殊毛细管。当然柱效会有所下降。（2）对于普通毛细管，可采用轴向照射和多次反射来增加光路长度。1）轴向照射：将激光光束从毛细管末端沿管轴方向入射，在毛细管侧面进行检测。2）多次反射：在毛细管壁镀上银，分别开入射窗和出射窗。当入射光以特定角度入射后，在毛细管内反射30～40次后从出射窗口射出。 来源：http://www.fudizao.com |