测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以KimwiPES低尘擦拭纸(一、产品应用 ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。 该产品可用于以下几个方面: * 紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值; * 核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值; * 探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品; * 细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值; * 蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值; * 蛋白标记检测:可检测被BCA、Bradford或Lowry标定的蛋白样品,自动画出标准曲线并计算出待测蛋白质浓度。 二、 产品简介 NanoDrop 2000超微量分光光度计是NanoDrop的最新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受专利保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。 NanoDrop 2000使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,检测吸收值可高达300ABS(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。
待测样品的均质性是NanoDrop 2000的最高要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为最佳,若无vortex mixer也应以piPETte吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂,则改以55゚C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保 2ul 具有代表性。 检测时选择不同检测模式,可以得到最快速的结果: ● Nucleic Acid – 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。 ● UV-Vis – 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。 ● A280蛋白质定量法 – 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。 ● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。 * 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在最佳时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线最多可有七个标准品,每个标准品最多可做五重复。 编号:34155)擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。 浓度范围: 样品种类 最低浓度 最高浓度 (超过时请稀释样品) 再现性 (五重复以上) 核酸 2 ng/ul 15000 ng/ul (dsDNA) 12000 ng/ul (RNA) 浓度范围在 2-100 ng/ul 时,SD为 ± 2 ng/ul 浓度范围大于 100 ng/ul 时,CV为 ± 2% 纯BSA 0.10 mg/ml 100 mg/ml 浓度范围在 0.05-10 mg/ml 时,SD为 ± 0.10 mg/ml 浓度大于 10 mg/ml 时,CV为 ± 2% 蛋白质,以BCA方式定量 0.2 mg/ml 8.0 mg/ml CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然) 蛋白质,以modified Lowry方式定量 0.2 mg/ml 4.0 mg/ml CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然) 蛋白质,以Bradford方式定量 100 ug/ml 8000 ug/ml 浓度范围在 100-500 ug/ml 时,SD为 ± 25 ug/ml 浓度大于 500 ug/ml 时,CV为 ± 5% 蛋白质,以Mini Bradford方式定量 15 ug/ml 100 ug/ml 浓度范围在 15-50 ug/ml 时,SD为 ± 4 ug/ml 浓度大于 50 ug/ml 时,CV为 ± 5% 三、技术参数: 1、波长范围: 190-840nm; 2、波长精度: 1nm; 3、分辨率: |