Tubulin即微管蛋白,是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin,其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成异源二聚体,是形成微管的最主要的两种Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa,其实际检测条带均在55kDa左右。作为内参,β-tubulin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western Blotting时上样量是否一致的参照, 也常被用于免疫染色观察细胞的微管结构。 如何选择合适的β-Tubulin抗体? 内参抗体虽然选择较多,但是也需要遵循一定的原则,并契合实际的应用要求。首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-Tubulin的检测分子量大约在55kD,因此该内参抗体不是很适合用于检测50kD-60kD大小目标蛋白的WB实验中。另外,不同的组织来源的样本在选择内参时还有一定的区别。比如一些少量特殊的情况下,如脂肪组织或细胞内,β-Actin的表达量就很少,不适合做内参另外,我们还需要考虑自己的需要,特别是实验应用上的需要。一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl β-Tubulin抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000,最终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的β-Tubulin抗体(假如WB检测的稀释比率是 1:200,最终使用液相当于2ml)性价比更高。因此在选择抗体的时候,不但需要考虑抗体的量,还需要考虑抗体的效价,即不同应用的建议稀释比率。一些国内的供货商也能提供分装的β-Tubulin抗体,但是在品牌和质量保障上都有不足。国产分装的β-Tubulin抗体在质量稳定性上有不足,并且经过分装以后,其效价也有损失。而原产于国内实验室的β-Tubulin抗体有些具有较好的检测活性,但是在应用类型上有差距,并且在批次之间的稳定性上较难控制,而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。如果您想买到一支性价比更高,同时也是原装进口品牌的β-Tubulin内参抗体,那EarthOx可能会是您的一个重要考虑选项之一。我们向您推荐EarthOx的Beta-Tubulin内参抗体Anti-beta Tubulin Monoclonal Antibody [H3](货 号E021040)。抗体单克隆抗体,克隆号为H3。其抗原为细菌来源的β-Tubulin,这样的一个优势是,其检测种属非常的广泛,对从低等的诸如衣藻、果蝇,到非洲蟾蜍、更格卢鼠、小鼠以及人等都有广泛的识别性,也算是一个真正保守的内参抗体。另外,该抗体的效价非常高,WB实验推荐稀释比率为1:1000-1:10000,甚至有客户报告更高的稀释比率。该β-Tubulin内参抗体免疫荧光的效果也非常棒,是一款非常适合做免疫荧光对细胞骨架进行染色定位的抗体产品。另外,也有客户报告使用该抗体用于组织的荧光染色,也取得了意外的效果。 |