|
随着蛋白质组学的迅猛发展，重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等，可用于辅助目标蛋白的纯化，这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段（序列为：EQKLISEEDL）。Myc标签可放在C端或N端，但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此 Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。Myc标签已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。如何选择合适的Myc标签抗体？我们在选择一个标签抗体时，主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括，Myc抗体的应用检测类型、Myc抗体的克隆性及制备来源等。比如 该Myc抗体是否能用于免疫荧光IF的检测？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验？是否需要特异性更好的单克隆Myc标签抗体？一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl Myc抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的Myc抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。为什么选择EarthOx的Myc单克隆抗体（货号E022050）目前市面上能提供的Myc抗体有国产分装或原产的；也有原装进口，诸如Abcam、CST、Sigma、Novus、Millipore等。国产分装的Myc抗体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的Myc抗体有些具有较好的检测活性，但是在应用类型上有差距，并且在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。 因此，我们向您推荐美国EarthOx的Myc标签抗体 Anti-Myc Tag Monoclonal Antibody [Myc.A7]（货号为E022050）。该Myc抗体为单克隆抗体，克隆号为Myc.A7。其抗原为KLP偶联的c-Myc 410-419位肽段（序列为：EQKLISEEDL），即Myc标签蛋白作为免疫原。该Myc单克隆抗体的效价非常高，WB实验推荐稀释比率为 1:1000-1:10000，甚至有客户报告更高的稀释比率。在免疫荧光IF、免疫沉淀IP实验里的表现也很优异。 |