Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,其余两种广泛分布于各种组织中,包括 β-actin和γ-non-muscle actin。β-actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达量非常丰富,其含量占所有细胞总蛋白的50%。但是在一些少量特殊的情况下,如脂肪组织或细胞 内,β-Actin的表达量就很少。β-actin由375个氨基酸组成,分子量大小为42-43kDa左右。 如何选择合适的β-Actin抗体? 内参抗体虽然选择较多,但是也需要遵循一定的原则,并契合实际的应用要求。首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-Actin的检测分子量大约在42kD,因此该内参抗体不是很适合 用于检测38kD-48kD大小目标蛋白的WB实验中。另外,虽然β-Actin是最合适的内参抗体之一,但是在某些条件下,一些因素也会导致样品间β-Actin含量的变化。特别需要注意的是,在脂肪组织里,β-Actin的表达量非常低,不适合作为内参。另外,我们还需要考虑自己的需要,特别是实验应用上的需要。一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特 异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl β-Actin抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000,最终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的β-Actin抗体(假如 WB检测的稀释比率是 1:200,最终使用液相当于2ml)性价比更高。因此在选择抗体的时候,不但需要考虑抗体的量,还需要考虑抗体的效价,即不同应用的建议稀释比率。如果您只想买到一支性价比更高,同时也是原装进口品牌的β-Actin内参抗体,那EarthOx可能会是您的一个重要选择之一。我们向您推荐EarthOx的β-Actin抗体(货号E021020)。该抗体使用的免疫原为KLH偶联的Beta Actin N末端多肽,可识别人、小鼠、大鼠、兔子和鸭子以及其他种属的Beta Actin蛋白。但是其价格只有CST的60%,不到Abcam的一半,性价比确实非常明显。EarthOx作为美国一家生产型品牌,为多个国际知名品牌提供OEM服务,因此其价格低廉,其质量也经受过市场检验 |