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GAPDH抗体大全——总有一款合适的GAPDH抗体 在Western Bloting实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比如内参GAPDH的含量来进行校正。当然除了GAPDH抗体，β-Actin抗体、β-Tubulin抗体等也是最常见的内参抗体。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。选择合适的GAPDH抗体显得尤为重要，首先GAPDH的WB检测条带大约为36kDa，因此对于一些待检测分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤为合适。一般来说，国产的抗体在质量稳定性、效价等方面存在不足，但是进口品牌如Abcam、Millipore、CST等价格偏高，一般在￥3000/100ul左右。下面我们为您推荐三款GAPDH原装进口抗体，分别是美国EarthOx和ProteinTech的产品。EarthOx的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody（货号E021010）是小鼠源的单抗，其效价很高，厂商推荐的WB起始稀释比率为1:1000，实际应用过程中，有使用1:10000或更高的报告，远远高于此稀释比率，说明其免疫效价很高，另外，其检测种属也很多，包括人、牛、猪、小鼠、大鼠等。右图为EarthOx的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody（货号E021010）在不同细胞系内WB的检测结果。 货号 品牌 品名 来源 应用类型 特点 说明书 E021010 EarthOx Anti-GAPDH Monoclonal Antibody 小鼠 WB, IF 效价极高，检测种属多 10494-1-AP ProteinTech GAPDH Polyclonal Antibody 兔 WB, ELISA 兔源 60004-1-Ig ProteinTech GAPDH Monoclonal Antibody 小鼠 WB, ELISA, IHC, IF 应用类型多 ProteinTech的GAPDH Polyclonal Antibody（货号10494-1-AP）则是一款兔源多克隆GAPDH抗体，对于需要兔源GAPDH抗体的客户则是一个不错的选择。同样，ProteinTech的GAPDH Monoclonal Antibody（货号60004-1-Ig）则是另一款单克隆抗体，除了WB和IF外，还可以应用于免疫组化IHC等实验。需要注意的是IF也是GAPDH抗体常用的应用类型之一。左图为ProteinTech的GAPDH Monoclonal Antibody（货号60004-1-Ig）抗体在石蜡包埋、福尔马林固定的切片上的应用。 |